正文
ELISA检测试剂盒的使用须知
文章来源:江苏晶美生物科技有限公司   添加时间:2020/9/24 15:11:54 点击率:75

使用ELISA检测试剂盒进行试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应。

在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:

固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。

包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。


除此之外还要注意以下事项:

1.确定ELISA检测试剂盒在有效期内;

2.仔细阅读说明书;

3.按说明书确定所有试剂齐全(数量、体积);

4.标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备,尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存;

5.根据检测标本数量确定所需试剂的量;

6.准备好所有实验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等;

7.按说明书将所用试剂平衡至室温,配制所需试剂。

上一条新闻:ELISA实验中显色异常的原因      下一条新闻:ELISA实验中的主角之一 -—样      
 

地址:江苏省大丰国际软件园1号楼6F 邮编:224100 电话:0515-87103988 传真:0515-83911098 邮箱:jsjingmeibio@163.com
CopyRight @ www.jsjmsw.com 江苏晶美生物科技有限公司 .All Rights Reserved 备案号:苏ICP备15003087号< 网站地图

 

客户服务热线

0515-87103988

在线客服