在ELISA实验的过程中，往往会出现“溢值”的现象，接下来就跟大家分析一下出现溢值的原因。

1、样品/标准品不正确稀释。

2、孵育时刻/温度不正确。

3、ELISA试剂盒在孵育时未盖上酶联板覆盖物：在孵育时需盖上酶联板覆盖物，以避免液体蒸腾或孵育期间的污染。

4、检测波长不正确：要确保分光光度剂的检测波长是正确的。

5、TMB底物的显色时刻过长：请监控显色时刻。有时显色时刻或许因为温度和其它检测条件的不同而稍有变化。

6、样品/标准品污染：样品或标准品的污染或许会导致检测成果“溢值”。

7、巧合试剂不正确稀释：要严厉依照说明书来稀释巧合试剂，浓度过高会形成OD的“溢值”。

8、所用稀释液不对：ELISA试剂盒只能运用相应试剂盒内的稀释液稀释样品和标准品。

找到原因后，解决问题就简单的多了。各位科研者们在进行实验前，一定要对ELISA试剂盒说明书细心的阅读，并严格依照要求来操作。